Разработка и валидация методики определения 3-хлорпропан-1,2-диола в субстанции холина альфосцерат методом ГЖХ
ВВЕДЕНИЕ
Качество лекарственного препарата определяется установлением его подлинности, определением его чистоты и количественным содержанием чистого вещества в препарате. Определение всех этих показателей составляет суть фармацевтического анализа, результаты которого для каждого отдельного препарата должны строго соответствовать требованиям Государственной фармакопеи.
Анализ остаточных растворителей в фармацевтической промышленности имеет исключительное значение для безопасности пациентов. В фармацевтической продукции возможно присутствие остаточных растворителей после процесса производства активных фармацевтических ингредиентов или конечных продуктов. Эти растворители не имеют терапевтического значения, поэтому их необходимо по возможности удалять. Контроль и управление уровнем остаточных растворителей осуществляется по многим причинам, среди которых: безопасность, влияние на форму кристаллов, растворимость, биодоступность и стабильность. Контролировать необходимо все лекарстве
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………….. 4
Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР………………………………………….. 6
1.1 Газовая хроматография. Сущность хроматографического процесса…... 6
1.2 Принципиальная схема газового хроматографа………………………… 8
1.3 Ввод анализируемой пробы………………………………………………. 10
1.4 Колонки в газовой хроматографии……………………………………….. 11
1.4.1 Набивные (насадочные) колонки……………………………………….. 11
1.4.2 Капиллярные колонки…………………………………………………... 12
1.5 Неподвижные жидкие фазы в ГЖХ……………………………………… 13
1.5.1 Классификация НЖФ…………………………………………………… 13
1.6 Требования, предъявляемые к НЖФ……………………………………... 14
1.7 Выбор НЖФ………………………………………………………………... 15
1.8 Выбор подвижной фазы…………………………………………………... 16
1.9 Детекторы………………………………………………………………….. 18
1.10 Валидация аналитических методик……………………………………... 20
1.11 Специфичность…..……………………………………………………….. 21
1.12 Предел количественного определения………………………………….. 22
1.13 Аналитическая область методики………………………………………. 22
1.14 Линейность ………………………………………………………………. 23
1.15 Правильность …………………………………………………………….. 24
1.16 Прецизионность …………………………………………………………. 25
1.16.1 Повторяемость (сходимость) …………………………………………. 26
1.16.2 Внутрилабораторная (промежуточная) прецизионность …………… 27
1.17 Представление результатов валидации………………………………… 27
1.18 Валидация методики количественного определения остаточных органических растворителей .………………………………………………… 28
1.19 Критерии оценки параметров…………………………………………… 28
1.20 Остаточные органические растворители ………………………………. 29
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ………………………………………... 30
2.1 Объект исследования……………………………………………………… 30
2.2 3-хлорпропан-1,2-диол…………………………………………………… 31
2.3 Оборудование……………………………………………………………… 32
2.4 Материалы ………………………………………………………………… 35
Глава 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ………………………………… 37
3.1 Разработка методики количественного определения 3-мХПД в субстанции холина альфосцерат……………………………………………… 37
3.1.1 Расчет допустимого содержания 3-мХПД……………………………... 37
3.1.2 Подбор хроматографической колонки………………………………… 37
3.1.3 Оптимизация условий для газа – носителя…………………………….. 40
3.1.4 Выбор температурного режима хроматографирования……………… 41
3.1.5 Итоговые условия хроматографирования……………………………... 42
3.1.6 Вывод расчетной формулы……………………………………………... 43
3.1.7 Пробоподготовка………………………………………………………… 44
3.2 Валидация разработанной аналитической методики…………………… 44
3.2.1 Специфичность………………………………………………………….. 44
3.2.2 Линейность………………………………………………………………. 45
3.2.3 Предел обнаружение и предел количественного определения………. 48
3.2.4 Аналитическая область методики……………………………………… 49
3.2.7 Промежуточная (внутрилабораторная) прецизионность……………... 51
ЗАКЛЮЧЕНИЕ………………………………………………………………... 54
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ……………………………… 55
ПРИЛОЖЕНИЕ………………………………………………………………... 60
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
1. Шаповалова Е.Н., Пирогов А.В. Хроматографические методы анализа. Методическое пособие для специального курса. – М.: МГУ им. М.В. Ломоносова, 2007. – 203 с.
2. Царев Н.И., Царев В.И., Катраков И.Б. Практическая газовая хроматография: Учебно-методическое пособие для студентов химического факультета по спецкурсу «Газохроматографические методы анализа». – Барнаул:Изд-во Алт.ун-та, 2000. – 156 с.
3. Сычев К.С. Методы высокоэффективной жидкостной хроматографии и твердофазной экстракции. Портал Anchem.ru «Аналитика-мир профессионалов» ЗАО «Найтек Инструментс». – М.: 2006. – 167 с.
4. Сакадынский К.И., В.В. Бражников, Волков С.А., Зельвенский В.Ю., Ганкина Э.С., Шатц В.П. Аналитическая хроматография. – М.:Химия, 1993. – 464 с.
5. Винарский В.А. Хроматография [Электронный ресурс]: Курс лекций в двух частях: Часть 1. Газовая хроматография. – Электрон. текст. дан. (4,1 Мб). – Мн.: Научно-методический центр «Электронная книга БГУ», 2003. – Режим доступа: http://anubis.bsu.by/publications/elresources/Chemistry/vinarski.pdf . – Электрон. версия печ. публикации, 2002. – PDF формат, версия 1.4. – Систем. требования: Adobe Acrobat 5.0 и выше. – № гос. регистрации 1200300210.
6. Илларионова Е.А., Сыроватский И.П. Основы газовой хроматографии. Практическое применение метода в фармацевтическом и химико-токсикологическом анализе: учеб. пособие / Е.А. Илларионова, И.П. Сыроватский: ГБОУ ВПО ИГМУ Минздрава России. – Иркутск: ИГМУ, 2013. – 76 с.
7. ОФС.1.1.0012.15 Валидация аналитических методик. МЗ РФ. – XIV изд. – Т. 1. – Москва, 2018 г.
8. ОФС.1.2.1.2.0001.15 Хроматография. МЗ РФ. – XIV изд. – Т. 1. – Москва, 2018 г.
9. AOAC Appendix F: Guidelines for Standard Method Performance Requirements
10. European Commission health & consumer protection directorate-general, SCF/CS/CNTM/OTH/17 Final
11. ICH Q3C (R6) Guideline for Residual Solvents
12. Основы аналитической химии. В 2 кн. Кн. 1. Общие вопросы. Методы разделени
Выбор газа-носителя зависит, главным образом, от нагрузки неподвижной жидкой фазы, она же определяет оптимальный диапазон скоростей газов. Легкие газы-носители (водород, гелий) лучше применять для колонок с малым содержанием НЖФ, которые работают с высокими скоростями потока для быстрых аналитических разделений. Тяжелые газы-носители (азот, аргон) наиболее пригодны для колонок с высоким содержанием НЖФ, которые работают с оптимальной скоростью потока в препаративном режиме.
1.9 ДетекторыВ газовой хроматографии используют широкий круг детекторов, которые можно подразделить на интегральные и дифференциальные.
Интегральные – регистрируют изменение во времени суммарного количества всех компонентов, дифференциальные – измеряют мгновенную концентраци