Влияние раннего провоспалительного стресса, вызванного липополисахаридом, на постнатальный гиппокампальный нейрогенез
введением экзогенного мозгового нейротрофического фактора в течение 12 дней в правый боковой желудочек мозга взрослых крыс [104].
Предыдущие эксперименты показали, что BDNF также способствует выживанию нейронов. В культуре эксплантатов из субэпендимальной зоны переднего мозга взрослой крысы, подвергнутой воздействию мозгового нейротрофического фактора, более 35% новых нейронов выжили через 22 дня, более 25% выжили через 42 дня. В контрольной культуре ткани наблюдалась практически полная гибель нейронов. Выжившие клетки экспрессировали тропомиозиновый тирозинкиназный рецептор TrkB, высокоаффинный для BDNF [56]. Исследования также показали, что удаление TrkB в нейральных клетках-предшественниках приводит к ингибированию их пролиферации и уменьшению толщины слоя гранулярных клеток. Напротив, удаление TrkB в дифференцированных нейронах тех же областей мозга не влияет на нейрогенез [60].
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 3
ВВЕДЕНИЕ 4
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1.1 История формирования представлений о нейрогенезе зрелого мозга у млекопитающих 7
1.2 Нейрогенные зоны головного мозга. Этапы трансформации клеток-предшественников нейронов 9
1.3 Нейрогенная ниша. Молекулярные факторы регуляции нейрогенеза 11
1.3.1 Роль цитокинов в регуляции нейрогенеза 17
1.3.2 Классический и альтернативный пути активации микроглии 22
1.3.3 Влияние нейротрансмиттеров на нейрогенез 23
1.3.4 Влияние гормонов на нейрогенез 27
1.4 Функциональное значение новых нейронов 30
1.5 Роль провоспалительного стресса в развитии патологий ЦНС 31
1.6 Механизм ЛПС-индуцированного воспалительного стресса 33
1.7 Сигнальные пути активации NF-κB и IRF3 через TLR4 36
1.7.1 MyD88-зависимый сигнальный путь 36
1.7.2 TRIF-зависимый сигнальный путь 37
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 38
2.1 Содержание животных 38
2.2 Модель детского провоспалительного стресса 38
2.3 Мечение пролиферирующих клеток, забор мозга и создание срезов на вибротоме 38
2.4 Непрямое иммуногистохимическое определение включения BrdU в ДНК пролиферирующих клеток 39
2.5 Двойное иммунофлуоресцентное окрашивание при помощи вторичных антител к анти-BrdU IgG и анти-NeuN IgG 41
2.6 Фотографирование срезов и подсчет клеток в области интереса (ROI) 42
2.7 Статистическая обработка результатов 43
3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 44
3.1 Анализ результатов иммуногистохимического окрашивания 44
3.2 Сравнение результатов с ранее полученными данными 46
3.3 Анализ результатов иммунофлуоресцентного окрашивания 48
3.4 Обсуждение 50
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 53
ВЫВОДЫ 54
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 55
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Гомазков О. А. Нейрогенез как адаптивная функция взрослого мозга // ред. Александровна Фомина Светлана – Москва: Икар, 2014.
Дубовая А. В., Ярошенко С. Я., Прилуцкая О. А. Хронический стресс и нейротрофический фактор головного мозга // Практическая медицина. – 2021. – Т. 19. – №. 2. – С. 19-27.
Заморина С. А., Раев М. Б. Toll-подобные рецепторы-подъем по тревоге // Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН. – 2016. – №. 2. – С. 8.
Комлева Ю. К. и др. Регенеративный потенциал головного мозга: популяционный состав и формирование регуляторного микроокружения в нейрогенных нишах // Анналы клинической и экспериментальной неврологии. – 2014. – Т. 8. – №. 4. – С. 44-52.
Матвеева В. Г. и др. Роль триггерного рецептора, экспрессируемого на миелоидных клетках, в активации врожденного иммунитета // Общая реаниматология. – 2011. – Т. 7. – №. 3. – С. 70-74.
Моргун А. В. и др. Структурная и функциональная гетерогенность астроцитов головного мозга: роль в нейродегенерации и нейровоспалении // Бюллетень сибирской медицины. – 2014. – Т. 13. – №. 5. – С. 138-148.
Обухов Д. К., Пущина Е. В., Вараксин А. А. Структура пролиферативных зон в ЦНС взрослых позвоночных животных // Вопросы морфологии XXI века. – 2015. – Т. 4. – С. 43-51.
Патлай Н. И., Сотников Е. Б., Тучина О. П. Роль микроглиальных цитокинов в модуляции нейрогенеза во взрослом мозге // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2020. – №. 5. – С. 15-23.
Перегуд Д. И. и др. Влияние раннего провоспалительного стресса на экспрессию различных транскриптов BDNF в отделах мозга самцов крыс препубертатного возраста // Вавиловский журнал генетики и селекции. – 2016. – Т. 20. – №. 2. – С. 191-197.
Тибекина Л. М. Нейрогенез и клеточные технологии в лечении заболеваний и повреждений нервной системы // Здоровье–основа человеческого потенциала: проблемы и пути их решения. – 2014. – Т. 9. – №. 1. – С. 150-156.
В здоровом состоянии микроглия находится в состоянии покоя (М0). Трансформацию из состояния покоя в фенотип М1 называют классическим путём активации микроглии, в фенотип М2 – альтернативным [8].
Активация микроглии по классическому пути (рисунок 2) приводит к образованию фенотипа М1, при котором клетки секретируют провоспалительные цитокины, такие как IL-6, IL-1β, TNF-α, NO, угнетающие нейрогенез. Классическая поляризация микроглии происходит при стимуляции молекулярными паттернами, ассоциированными с повреждениями ткани (DAMPs), паттернами, ассоциированными с патогенами (PAMPs), цитокинами IL-1β, IFN-γ, TNF-α. ЛПС является иммунопотентным PAMP, поэтому стимуляция эндотоксином ведёт к поляризации микроглии по типу М1 [8].
Альтернативный путь активации (рисунок 2) включается при стимуляции микроглии цитокинами IL-4 и IL-13. Поляризация по типу М2 приводит к образованию IL-10, IL-4, IGF-1, TGF-β CITATION Чер17 \l 1049 (Черных Е. Р., 2017).