Практическое применение разделения аминокислот в водно-органических и мицеллярных подвижных фазах методом тонкослойной хроматографии
Введение
Аминокислоты, как составные частицы белков, участвуют практически в любом процессе, происходящем в клетке, и проявляют неисчерпаемое разнообразие функций. При изучении молекулярных механизмов биологических процессов неизбежно следует изучать один или несколько белков. В количественном отношении белки занимают первое место среди биологических молекул. Они встречаются во всех клетках и в любой части клетки. Также разнообразие белков; в клетке можно найти тысячи типов этих молекул. Не мало важно, белки сильно различаются по своим биологическим функциям и представляют собой наиболее важные конечные продукты информационных метаболических путей. Белки служат молекулярными инструментами, с помощью которых генетическая информация находит свое истинное воплощение [1,2].
Ключом к пониманию структуры тысяч различных белков является структура относительно простых мономерных звеньев. Для построения всех белков, будь то белки самых древних бактериальных линий или современных биологиче
СОДЕРЖАНИЕ
Введение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3
Глава 1. Литературный обзор . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4
1.1. Общие положения высокоэффективной тонкослойной хроматографии. . 4
1.1.1. Обращённофазовая ВЭТСХ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
1.1.2. Типы и подготовка пластинок. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .13
1.1.3. Насыщение хроматографической камеры . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
1.1.4. Подготовка и нанесение проб. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
1.1.5. Проявление хроматограмм . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
1.2. Типы сорбентов применяемые в тонкослойной хроматографии . . . . . . . 26
1.3. Качественные реакции определения аминокислот . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
1.4. Краткие свойства аминокислот, входящих в состав белков . . . . . . . . . . 31
Глава 2. Экспериментальная часть . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32
2.1. Реактивы, приборы и необходимое оборудование . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32
2.2. План выполнения эксперимента . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .33
Глава 3. Результаты исследований. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
3.1. Количественное и качественное определение аминокислот в исследуемых препаратах в системах с этанолом . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
3.2. Количественное и качественное определение аминокислот в исследуемых препаратах в системах с диметилформамидом . . . . . . . . . . . . . 39
Заключение. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44
Список литературы . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .45
Приложение . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .48
Список литературы
1. Ю.Бёккер Хроматография. Инструментальная аналитика. – М. «Техносфера», 2021. – 471 с.
2. Долгоносов, А. М. Неспецифическая селективность в проблеме моделирования высокоэффективной хроматографии: моногр. / А.М. Долгоносов. - М.: Либроком, 2019. - 256 c.
3. Дэвени Т., Гергей Я. Аминокислоты. Пептиды и Белки.-М.: Мир, 2016. -362 с.
4. Ильясова P.P., Майстренко B.M. и др. Определение аминокислот в условиях ТСХ: -Всероссийская конференция "Теория и практика хроматографии. Применение в нефтехимии". -Самара, 2015. -С.65-67.
5. Калашникова О.М., Шаповалова Е.Н., Бархутова Д.Д. и др. Определение аминокислотного состава ТСХ. Вестник МГУ. Химия.-2019, Том 45.-№6.-С. 393-398.
6. Кирхнер. Ю. Тонкослойная хроматография в 2 ч. Кн. 1-М.:Мир, 2021.-652 с.
7. Киселев, А. В. Межмолекулярные взаимодействия в адсорбции и хроматографии / А.В. Киселев. - М.: Высшая школа, 2016. - 360 c.
8. Кнорре Д. Г. Биологическая химия /Д. Г. Кнорре, С. Д. Мызина. -М.: Высшая школа, 2021. -479 е.
9. Ларионова Д.А., Штыков С.Н. Разделение и количественное определение биологически активных аминов методом ТСХ: - Всероссийская конференция "Теория и практика хроматографии. Применение в нефтехимии". -Самара, 2015. -С. 126-127.
10. Ленинджер А. Биохимия: молекулярные основы структуры и функций клетки.: Пер. с англ. М. 2020.
11. Малахова И.И. Количественная высокоэффективная тонкослойная хроматография аминокислот: Автореф. дис. канд. хим. наук: 05.11.11 /МГУ им. М.В. Ломоносова, М., 2019. -24 с. -Библиогр.: - С.22-24.
12. Машковский М. Д. Лекарственные средства, т.1,2. -М.: Новая волна, 2020.-544 с.
13. Наточин Ю.В. Введение в нефрологию: руководство для врачей. Под. ред. Ю. В. Наточин, Н. А.Мухин. -М.: Гэотар-Медиа, 2017. -160 с.
14. Нестеренко, П. Высокоэффективная комплексообразовательная хроматография ионов металлов / П. Нестеренко, Ф. Джонс, Б. Полл. - М.: Техносфера, 2019. - 312 c.
15. Рассел, Джесси Хроматогр
Современные пластины отличаются однородностью покрытия, равномерной толщиной, прочностью и высокой плотностью слоя. Современная пластинка отличается однородностью покрытия, равномерной толщиной, прочностью и высокой плотностью слоя. плотность слоя высокая. Эти пластины сохраняют свои хроматографические характеристики неизменными в течение определенного периода времени. Следует учитывать, что разные производители используют разные связующие, что приводит к разным хроматографическим свойствам пластин [21,22].
Максимальное количество наносимого образца составляет около 0,5 мкл для обычных пластин с пакетами силикагеля (минимум до 2 мкл), для высококачественных пластин (ВЭТСХ или nanoТСХ) - от 100 до 200 нл (максимум до 500 нл). Планшет ВЭТСХ при правильном использовании характеризуется большей разделительной способностью и меньшим временем анализа. Ограничения тестирования, определяемые подходом к применяемому решению, несколько улу