Диагностика картофеля ВНЦ ран методом ПЦР-РВ анализа
В статье представлены результаты выявления вирусных заболеваний картофеля методом ПЦР -РВ анализа. Картофель подвержен действию различных патогенов вирусной, бактериальной и грибковой природы. Точная диагностика и идентификация важна в производстве безвирусного посадочного материала, а также в мониторинге фитосанитарного состояния посадок на основе качественной полимеразной цепной реакции, позволяющей быстро и точно идентифицировать основные вирусные патогены картофеля: YВК, XВК, MВК, SВК, вирус скручивания листьев, а также вироид веретеновидности клубней (ВВКК). Цель исследований является диагностика фитопатогенов картофеля методам ПЦР-РВ.
Ключевые слова: вирусные болезни картофеля, фитопатология, полимеразная цепная реакция (ПЦР-РВ), диагностика.
Список литературы
1. Анисимов Б.В. Фитопатогенные вирусы и их контроль в семеноводстве картофеля (Практическое руководство). – М.; ФГНУ «Росинформагротех». – 2004. – 80 с
2. Шпаар Д., Шуманн П. Борьба с вирусными и вироидными болезнями //
Защита и карантин растений. Выпуск 5. 2004. – С. 15—17
3. Бирюкова В.А., Мананков В.В., Жарова В.А., Рогозина Е.В. Маркер-вспомогательная селекция на устойчивость к золотистой картофельной нематоде. В книге: 125 лет прикладной ботаники в России. Сборник тезисов. Министерство науки и высшего образования РФ, Федеральный исследовательский центр Всероссийский институт генетических ресурсов растений им. Н.И. Вавилова. 2019. С. 214.
4. Клименко Н. С., Гавриленко Т. А., Костина Л. И., Мамадбокирова Ф. Т., Антонова О. Ю. Поиск источников устойчивости к Globodera pallida и к PVX в коллекции отечественных сортов картофеля с использованием молекулярных маркеров / Биотехнология и селекция растений. 2019; Т. 2(1), С. 42-48.
5. Шведченко В.К., Хасанов В.Т., Фида М.А., Бейсембина Б., Харченко П.Н. и др. Сравнение методов иммуноферментного анализа и ПЦР в реальном времени для диагностики зараженности сортообразцов картофеля вирусами // Вестник Российской Академии сельскохозяйственных наук. 2014. № 2.
6. Бухонова Ю.В., Михина Н.Г. Мониторинг вредителей и болезней картофеля. Защита и карантин растений. 2022. № 11. С. 20-24.
7. Кисилева И.С. Физиология растений. - Екатеринбург. Изд. Уральского университета. 2018. 120 с.
8. Mori K., Sakamoto Y., Mukojima N., Tamiya S., Nakao T., Ishii T. and Hosaka K. (2011) Development of a multiplex PCR method for simultaneous detection of diagnostic DNA markers of five disease and pest resistance genes in potato. Euphytica 80: 34
ПЦР-РВ проведена при условиях, предусмотренных в инструкции производителя ООО «Синтол». Интерпретация результатов ОТ-ПЦР-РВ была проведена в программе по инструкции АНК-48 компании ООО «Синтол».
Зараженность образцов определяли с использованием наборов реагентов «PotatoVirus X и PotatoVirus Y-РВ»; «PotatoVirus M и PotatoLeafroll Virus- РВ»; «Potato spindletuber viroid-PB». При исследовании методом ПЦР-РВ в наборе используются два олигонуклеотидных праймера, фланкирующих специфический фрагмент ДНК гена фитопатогена и внутреннего положительного контроля, а также два флуоресцентных зонда.
Проведение реакции обратной транскрипции и последующей мультиплексной ПЦР-РВ в наборе реагентов осуществляется последовательно в одной пробирке в течение одного запуска амплификатора.
Резул