Особенности метаболической активности клеток Hеla в условиях действия экстракта Gаnoderma Lucidum
В биомедицинских исследованиях и при разработке новых видов лечения часто используют выращенные в лаборатории культуры человеческих клеток. Среди множества клеточных линий одной из самых известных является HeLa – клетки эндотелия матки. Комплексный вид Ganoderma lucidum (W. Curtis:Fr.) P. Karst. объединяет внутривидовые группы, филогенетическая концепция которых до сих пор не разработана [14]. Значительные трудности при изучении клетки hela в условиях действия экстракта Ganoderma lucidum вызваны их высокой степенью вариабельности в зависимости от условий культивирования.Высокая биологическая и токсическая активность современных противоопухолевых средств обусловлена их повреждающим действием не только на опухолевые, но и здоровые клетки) [27]. Механизм их действия хорошо изучен: они действуют на клетку на стадии метафазы, разрушают топоизомеразу во время репликации ДНК, после чего клетка гибнет путем некроза. Побочным эффектом механизма действия таких препаратов является развитие интоксикации.
Список сокращений
Введение
Глава 1. Обзор литературы по теме исследования
1. Экстракты штаммов Ganoderma lucidum (биологическая активность, противоопухолевое действие)
2 Особенности исследования жизнеспособности, метаболической активности клеток млекопитающих с использованием МТТ- Теста
3. Клетки HeLa как объект для изучения противоопухолевой активности различных веществ
Глава 2. Материалы и методы исследования
1. Обьекты исследования, реактивы
2. Методы
2.1. Культивирование линейных опухолевых клеток
2.2. Приготовление различных концентраций дмсо и Ganoderma lucidum
2.3 Проведение МТТ-Теста
Глава 3. Полученные результаты и их обсуждение
1. Изменение жизнеспособности клеток HeLa под влиянием разных концентраций дмсо
2. Изменение жизнеспособности клеток HeLa под влиянием разных концентраций разных концентраций метанольного экстракта Ganoderma lucidum
3. Изменение жизнеспособности клеток HeLa, культивированных в течение 168 часов, под влиянием разных концентраций метанольного экстракта Ganoderma lucidum
Выводы
Список использованных источников
Список использованных источников
Антимонова, А.В. Изучение морфолого-физиологических характеристик и противоопухолевой активности лекарственного базидиального гриба Ganoderma lucidum (Curt Fr ) Р Karst/А.В. Антимонова, А.В. Либензон//Окружающая среда и здоровье Материалы всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов Суздаль,2005. – С. 315-317.
Антимонова, А. В. Изучение физиологических характеристик штаммов Ganoderma lucidum (Curt Fr ) Р Karst/А.В. Антимонова, Л.А. Завьялова, Л.В. Гарибова, Л.М. Краснопольская//Успехи медицинской микологии. Материалы третьего всероссийского конгресса по медицинской микологии. – М., 2005. – т 5. – С.164-166.
Антимонова, A.B. Оптимизация состава питательной среды для погруженного культивирования Ganoderma lucidum (Curt.:Fr.) P. Karst/ A.B. Антимонова, Л.М. Краснопольская//Микробиология. – 2006. – 2. – С.1-7.
Антимонова, А.В. Биотехнологический способ получения биологически активной биомассы базидиального гриба Ganoderma lucidum II Биология - наука XXI века/А.В. Антимонова//Тезисы докладов 7-й Пущинской школы-конференции молодых ученых Пущино, 200З. – С. 85.
Аникина, Л.В. Сравнительное определение жизнеспособности клеток с помощью МТТ и ресазурина/Л.В. Аникина, С.А. Пухов, Е.С. Дубровская, С.В. Афанасьева, С.Г. Клочков//Фундаментальные исследования. – 2014. – № 12-7. – С. 1423-1427
Атрошкин, К.А. Влияние гестагенов на жизнеспособность клеток культуры HeLa и экспрессию фактора bcl-2 при изолированном применении в сочетании с цитостатическими средствами/К.А. Атрошкин, Н.Л. Шимановский, А.В. Семейкин, Е.А. Кирсанова, М.А. Секирина//Российский биотерапевтический журнал. – т.7. – 2008. – №1. – С. 35.
Атрошкин, К.А. Сочетанное действие гестагенов и доксорубицина на клетки культур опухолевых линий HeLa и MCF-7/К.А. Атрошкин, Н.Л. Шимановский, А.В. Семейкин. – Вестник РГМУ. – 2009. – №1. – С. 57-61.
Практически не изучены морфологические, физиологические и биохимические особенности штаммов G lucidum, необходимые для выявления наиболее перспективных для практического использования штаммов антибиотические свойства G lucidum, которые должны быть обязательно проведены для всех продуктов, рекомендуемых для перорального введения. В связи с этим важное значение имеет комплексное изучение штаммового разнообразия G lucidum, создание эффективных способов погруженного культивирования и оценка биологической активности получаемого материала штаммов, в том числе противоопухолевых свойств и антибиотического действия. Штаммы различаются по спектру антибиотического действия и активности. Показано противоопухолевое действие фракций G lucidum, обогащенных водорастворимыми полисахаридами-гетерогликанами, при пероральном введении установлена зависимость противоопухолевого действия от применяемой дозы препарата полисахаридные фракции мицелия и плодовых тел одного штамма оказывают равный противоопухолевый эффект. В результате изучения морфологических характеристик колоний штаммов на плотных средах рекомендован минимальный набор из трех питательных сред, обеспечивающий проявление специфических морфологических черт отдельных штаммов. Определен температурный оптимум для культивирования исследованных штаммов выявлены пищевые предпочтения штаммов G.lucidum и предложены составы плотных и жидких питательных сред для каждого штамма. Разработан биотехнологический метод погруженного культивирования одного штамма G lucidum с применением методов математического планирования эксперимента, обеспечивающий двукратное увеличение выхода биомассы по сравнению с исходным уровнем и сокращение длительности культивирования.